siRNA敲减整合素连接激酶影响人阴茎海绵体平滑肌细胞功能的体外研究

作者： 郝一昌 [1] ; 李清 [1] ; 何培英 [2] ; 徐涛 [1] ; 白文俊 [1] ; 王晓峰 [1]

摘要：目的探讨整合素连接激酶（ILK）基因对人海绵体平滑肌细胞收缩和舒张功能的影响。方法人海绵体平滑肌细胞为实验对象，分为非沉默组、非处理对照组和ILK小于扰RNA（siRNA）实验纽，采用siRNA干扰技术下调细胞中ILK的表达，伸展实验和基质胶黏附实验分别检测ILK基因敲减前后海绵体平滑肌细胞伸展和黏附能力变化，Transwell小室观察ILK表达对海绵体平滑肌细胞迁移能力的影响，荧光标记的鬼笔环肽染色海绵体平滑肌细胞观察TLK基因敲减前后细胞骨架的变化。结果 黏附实验中，非沉默siRNA组、非处理对照组和实验组siRNA干扰的平滑肌细胞吸光度（A）值分别为0．184±0．034、0．179±0．028和0．092±0．010；迁移实验中，3组穿过Matrigel胶包被的Transwell小室的平滑肌细胞A值分别为0．184±0．017、0．188±0．013和0．106±0．003，实验组与非沉默siRNA组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；非处理对照组平滑肌细胞廊力纤维错综分布于细胞周边与胞质内，而实验组的细胞应力纤维仅分布于细胞边缘。结论ILK下调降低人海绵体平滑肌细胞的黏附、伸展、迁移能力，并通过影响细胞骨架重构参与调节平滑肌收缩与舒张状态，提示ILK基因有可能成为勃起功能障碍基因治疗的有效靶点。

关键字： 整合素连接激酶    SiRNA    基因治疗    勃起功能障碍      

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